說到混(hun)(hun)合型液相(xiang)色譜柱(zhu),它(ta)是(shi)一種(zhong)能夠(gou)發(fa)生多(duo)種(zhong)相(xiang)互作(zuo)用模(mo)(mo)式(shi)的(de)色譜柱(zhu),作(zuo)為色譜分(fen)離(li)的(de)核心,在目(mu)前的(de)液相(xiang)色譜分(fen)析中發(fa)揮著重(zhong)要(yao)的(de)作(zuo)用。混(hun)(hun)合模(mo)(mo)式(shi)的(de)色譜柱(zhu)也(ye)是(shi)種(zhong)類(lei)繁多(duo),有雙重(zhong)混(hun)(hun)合模(mo)(mo)式(shi)的(de),也(ye)有三重(zhong)混(hun)(hun)合模(mo)(mo)式(shi)的(de)。雙重(zhong)混(hun)(hun)合模(mo)(mo)式(shi)包括:反相(xiang)+陽(yang)離(li)子交(jiao)(jiao)換,反相(xiang)+陰離(li)子交(jiao)(jiao)換,反相(xiang)+HILIC等。三重(zhong)混(hun)(hun)合模(mo)(mo)式(shi)包括:反相(xiang)+陽(yang)離(li)子交(jiao)(jiao)換+陰離(li)子交(jiao)(jiao)換,HILIC+陽(yang)離(li)子交(jiao)(jiao)換+陰離(li)子交(jiao)(jiao)換等。
混(hun)合(he)模式色譜柱由(you)于(yu)其(qi)多種優點,實(shi)驗人(ren)員在分離復雜樣品時,越來(lai)越多的被(bei)使用到(dao)實(shi)驗中(zhong),賽默飛擁有的三重混(hun)合(he)模式Trinity系列色譜柱在單次運行(xing)中(zhong)可同時分離離子和疏水性分析物,消除了更換(huan)色譜柱,使用離子對(dui)或使用多種色譜填料(liao)的需要。
來來來
我們來隆重介(jie)紹一下Acclaim Trinity系列(lie)色譜(pu)柱(zhu)。Acclaim Trinity系列(lie)均為三重混合模式的色譜(pu)柱(zhu)。又分(fen)為P和Q兩個系列(lie),均采用納(na)米微球-硅膠雜化(hua)技術,一個顆粒上集成了三種分(fen)離(li)模式。P系列(lie)色譜(pu)柱(zhu)可以(yi)同時(shi)分(fen)離(li)陽離(li)子(zi)、陰(yin)離(li)子(zi)和非(fei)極性化(hua)合物(wu)。Q系列(lie)先(xian)賣個關(guan)子(zi)~
圖1. 納米(mi)微(wei)球-硅膠雜化技術
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新型Nanopolymer Silica Hybrid(NSH)技(ji)術在對(dui)以(yi)下物質分離時可以(yi)獲得(de)*的色譜性(xing)能:
01 | 原料藥和反離子 |
02 | 藥物反離子的篩選 |
03 | 酸性和堿性原(yuan)料(liao)藥及各自反(fan)離子的(de)混合物(wu) |
04 | 酸性、堿性和中性原料(liao)藥的混合物 |
圖2. Trinity P1柱和Trinity P2柱對(dui)比(bi)
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使用與維護
當次使用(yong)新的(de)色(se)譜柱(zhu)時,在進行任何進樣之前,應采用(yong)流動(dong)相進行*沖洗(例如,在推(tui)薦(jian)的(de)流速,大約使用(yong) 20 柱(zhu)體積)。
當切換到(dao)新(xin)的(de)流動(dong)相(xiang)時, 確保新(xin)的(de)流動(dong)相(xiang)與色(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)中以前的(de)流動(dong)相(xiang)相(xiang)容,以避免由于(yu)沉淀造成色(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)堵塞。在進行任何進樣(例(li)如 20 個柱(zhu)(zhu)體積)之前,應(ying)*調節色(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)。
使用(yong)色(se)譜(pu)柱前,需要把系(xi)統里置換為含有鹽的水相和有機相。保證色(se)譜(pu)柱一直在帶有緩沖鹽的體系(xi)下使用(yong),是(shi)對色(se)譜(pu)柱較好的維(wei)護。
色譜柱清洗
對于磷(lin)酸鹽(yan)緩沖(chong)液中使用的(de) 3.0 mm 內徑色(se)譜柱:
1
在(zai) 0.3 mL/min 流(liu)速時,使用 5 個柱體積的 20 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6 / 乙(yi)腈 v/v 50/50 清洗(xi)色譜柱。
2
在 0.3 mL/min 流(liu)速時(shi),使用 20 個(ge)柱體積的 100 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6 / 乙(yi)腈 v/v 90/10 清洗(xi)色譜柱(以(yi)強力清除(chu)滯留的離子物(wu))。
3
在 0.3 mL/min 流(liu)速時(shi),使用 5 個柱(zhu)體積的 10 mM 磷酸鈉(或(huo)鉀)緩沖(chong)液, pH 值(zhi) 6 / 乙腈 v/v 50/50 清洗色(se)譜柱(zhu)。
4
在 0.3 mL/min 流速(su)時,使用 20 個(ge)柱體積的 10 mM 磷(lin)酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6.4 / 乙腈(jing) v/v 20/80 清洗色(se)譜柱(以強力清除滯(zhi)留的疏水污染物)。
5
使(shi)用至少 20 個(ge)柱體積流動相平(ping)衡(heng)色譜柱。
典型應用
圖3. Trinity P1柱分析氯酸鹽(yan)和高氯酸鹽(yan)
圖4.Trinity P1同時分離藥物反離子
圖(tu)5.Trinity P2柱分析藥物相關陰離子和陽(yang)離子
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