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2020版藥典一部 地黃飲片和熟地黃中地黃苷D的分析
更新時間:2021-04-19   點擊次數:4587次

客戶向我(wo)們提供了地(di)黃(huang)(huang)苷D標準品(pin)溶(rong)液(液體)、地(di)黃(huang)(huang)飲片(pian)和熟地(di)黃(huang)(huang)(固體粉末)。希望(wang)本實(shi)驗室能夠(gou)按照2020版《中(zhong)國藥典(dian)》中(zhong)分析(xi)方法,篩選合適的(de)色譜,使地(di)黃(huang)(huang)飲片(pian)和熟地(di)黃(huang)(huang)中(zhong)地(di)黃(huang)(huang)苷D與其前后(hou)相鄰雜質之間的(de)分離度能夠(gou)達到基線分離,同時,地(di)黃(huang)(huang)苷D峰(feng)的(de)理論塔板(ban)數(shu)應滿足藥典(dian)要求(不(bu)低于5000)。

 

我們(men)按(an)照2020版《中國藥(yao)典》熟(shu)地(di)黃含量測定項下方法,對地(di)黃飲片和熟(shu)地(di)黃進行了提取處(chu)理,然后按(an)照藥(yao)典方法,

CAPCELL PAK C18 MGII色(se)譜(pu)柱(zhu)上得(de)到了(le)良(liang)好的(de)分析結果。

 

 
  

 

首先,下圖為使用CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm色譜柱,對(dui)地(di)黃苷D標準品的(de)分(fen)析結(jie)果(guo)。

 

HPLC Conditions :

色譜柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動相(xiang):0.1%磷酸(suan)/甲醇 = 95/5

流   速:1.0 mL/min

溫   度:35°C

檢   測:UV 203 nm

濃(nong)   度:客戶提供

進樣量(liang):10 µL

 

結果中,地黃苷D的保留時間(jian)為(wei)28.135 min,理(li)論塔板(ban)數為(wei)13067,滿足藥典不低于5000的要求(qiu),峰(feng)不對稱因子為(wei)1.00,峰(feng)形(xing)良好。

 

隨后,我們使用同樣(yang)方法對熟(shu)地黃(huang)和地黃(huang)飲片(pian)的實(shi)際樣(yang)品進行(xing)了分析,結果如(ru)下圖所示:

 

 

HPLC Conditions :

色譜柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流(liu)動相:0.1%磷酸(suan)/甲(jia)醇 = 95/5

流   速:1.0 mL/min

溫   度:35 °C

檢(jian)   測:UV 203 nm

濃   度(du):樣品按藥典方法處理

進樣量(liang):10 µL

 

地黃飲片中黃苷(gan)D與(yu)其前后(hou)相(xiang)鄰雜質之間的分離度分別為1.52和1.88熟地黃中地黃苷D與(yu)其前后相鄰雜質之間的分離度分別(bie)為1.65和(he)1.89,均可以得到(dao)基線分離。

然而從上面實際樣品的結果可以看到,地黃飲片樣品中地黃苷D與其前相鄰雜質之間的分離度僅為1.52,剛剛達到基線分離,為了使其得到更好的分離,我們嘗試對柱溫進行調整,分別在30℃和40℃對地黃(huang)飲片進行分析(xi),結果如下面兩張圖所示:

 

 

HPLC Conditions :

色譜柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動相:0.1%磷酸/甲醇 = 95/5

流   速:1.0 mL/min

溫   度:30°C / 40°C

檢   測:UV 203 nm

濃   度:樣品按(an)藥典(dian)方法(fa)處理

進樣(yang)量:10 µL

 

在30℃柱溫下,地黃苷D與其前后相鄰雜質之間的分離度分別為3.25和1.88,能夠得到良好的分離。在40℃柱溫下,地黃苷D與其前后相鄰雜質之間的分離度分別為0.90和1.66,地黃苷D與其前雜質未能達到基線分離,升溫不利于分離。

 

 

針對藥典中地黃(huang)(huang)飲片和熟地黃(huang)(huang)中地黃(huang)(huang)苷(gan)D的分析,我們總(zong)結了(le)以下(xia)注意事項:

(1). 由于中藥樣品中成分(fen)比(bi)(bi)(bi)較復雜,在(zai)不同色譜柱上的(de)分(fen)離情況差異比(bi)(bi)(bi)較大(da),建(jian)議客戶(hu)在(zai)分(fen)析時,可根(gen)據具體分(fen)離情況,對有機相比(bi)(bi)(bi)例及柱溫進行調整,以得到(dao)良好(hao)的(de)分(fen)離。

(2). 地(di)黃飲片及熟地(di)黃中(zhong)均含有(you)疏水(shui)性(xing)(xing)較大的(de)物質,我們(men)進(jin)行80min的(de)洗脫后,仍可能有(you)疏水(shui)性(xing)(xing)物質未得(de)到洗脫,建議客戶(hu)使用高(gao)有(you)機相進(jin)行沖洗。

 
 
  

 

綜(zong)上所述,使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱,按照2020版《中(zhong)國(guo)藥(yao)典(dian)》熟地黃含量測定項(xiang)下方(fang)法,能夠得到滿足(zu)藥(yao)典(dian)分(fen)離度和理論(lun)塔板數要(yao)求的分(fen)析結果。

 

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